Ascaris lumbricoides: Mimetismo molecular por absorción de epitopes P1 / Ascaris lumbricoides: Molecular mimicry by P1 epitope absorption

El mimetismo molecular se ha asociado con la cronicidad de las infecciones parasitarias. Este mecanismo puede deberse a absorción de moléculas del hospedador o a síntesis de moléculas similares. P1 ha sido detectado en diversas especies parásitas. Experiencias previas han demostrado epitopes P1 en ejemplares adultos de Ascaris lumbricoides. El objetivo de este trabajo fue estudiar la absorción de estos epitopes por estadios larvales del nematodo, a los fines de determinar el mecanismo de expresión de estos antígenos sobre la cutícula parasitaria. Las larvas fueron eclosionadas a partir de heces con huevos de este helminto. Fueron cultivadas en medio RPMI con eritrocitos P1. Se realizó la Técnica de Inhibición de la Aglutinación Semicuantitativa usando cuatro anticuerpos monoclonales anti-P1. El sistema revelador fue una suspensión de eritrocitos frescos P1 en medio enzimático de bromelina. Se investigaron por la misma técnica productos de excreción-secreción símil P1 usando larvas cultivadas en medio RPMI en ausencia de eritrocitos P1. Las larvas cultivadas con glóbulos rojos inhibieron la aglutinación de todos los anticuerpos monoclonales con los eritrocitos P1. No se identificaron productos de excreción- secreción símil P1. Se ha demostrado que las larvas de A. lumbricoides absorben epitopes P1 del medio de cultivo. Se concluye que el parásito puede absorber este antígeno durante su ciclo de vida para usarlo en el mimetismo molecular.

Molecular mimicry has been associated with chronicity of parasitic infections. This mechanism can be due to absorption of the host's molecules or to synthesis of similar molecules. P1 has been detected in various parasite species. Previous experiences have shown P1 epitopes in Ascaris lumbricoides's adult parasites. The aim of this study was to analyse absoption of these epitopes by nematode larvae in order to determine the mechanism by which the parasite can express these antigens on their cuticle. Larvae were hatched from the faeces with helminth eggs. Larvae were cultivated in RPMI medium with P1 red cells. The Quantitative Inhibition Agglutination Test was performed using 4 anti- P1 monoclonal antibodies. P1 fresh red cells in bromelin enzymatic medium was used as revealing system. Simil P1 excretory-secretory products were investigated using larvae cultivated in RPMI medium without P1 erythrocytes by the same technique. The larvae which were cultivated with red cells inhibited the agglutination between all anti- P1 monoclonal antibodies and P1 erythrocytes. Simil P1 excretory-secretory products were not identified. It was demonstrated that A. lumbricoides larvae absorb P1 epitopes from the culture medium. It can be concluded that the parasite can absorb this antigen during its life cycle in order to use it in molecular mimicry.

Ascaris lumbricoides: epitopes del Sistema P por método de cinética de la hemaglutinación / Ascaris lumbricoides: P system epithopes by haemogglutination kinetics method

Experiencias previas demostraron epitopes P1 en Ascaris lumbricoides por inhibición de la aglutinación. La cinética de la hemaglutinación aplica la extinción óptica relativa producida por un haz de luz trasmitido a través de una suspensión de pequeñas partículas, y permite obtener una estimación paramétrica de la tasa de hemaglutinación. El objetivo de este trabajo fue utilizar este método para demostrar la presencia de epitopes del Sistema P en extractos de A. lumbricoides. La técnica de inhibición de la aglutinación permitió seleccionar 10 extractos: 3 con y 7 sin epitopes P1. Se registró la cinética de la reacción Control: anti- P1- eritrocitos - P1 y la cinética de la misma reacción, previo contacto del anticuerpo con el extracto. Se calcularon y se compararon los valores de ³ EOR % (variación en el porcentaje de extinción óptica relativa) para ambas reacciones. Los resultados evidenciaron la presencia de epitopes P1, que no habían sido detectados por inhibición de la aglutinación, en 3 extractos. Para los extractos restantes, hubo coincidencia entre los resultados obtenidos por los dos métodos. La cinética de la hemaglutinación es sencilla, rápida y fácilmente adaptable para las experiencias en que se necesite evaluar una reacción antígeno-anticuerpo a través de la hemaglutinación.

Summary Previous experiences have demonstrated P1 epithopes in Ascaris lumbricoides by inhibition agglutination. Haemogglutination kinetics applies the relative optical extinction produced on a light beam transmitted through a suspension of small particles, giving a parametric estimate of the haemagglutination rate.The aim was to use this method for the demonstration of P System epithopes presence in A. lumbricoides extracts. inhibition agglutination test enabled the selection of 10 extracts: 3 with and 7 without P1 epithopes. Kinetics of anti- P1 - P1 erythrocyte control reaction and kinectics of the same reaction with a previous contact between antibody and extract were registered. ³ EOR % values (relative optical extinction variation) for both reactions were calculated and compared between themselves. The results proved P1 epithopes presence in 3 extracts, which had not been detected by inhibition agglutination. The results coincided for the remaining extracts by both methods. Haemogglutination kinetics is simple and fast and it is easily adapted for experiences in which the investigator needs to assess the antibody-antigen reaction by haemogglutination.